上海秉越電子儀器有限公司

培養（yǎng）基的滅菌及使用

1.每（měi）次配置時，要注意其生產日（rì）期是否在（zài）保質期（qī）內，查看其開瓶（píng）日（rì）期（qī）及瓶口密封性，保證其未變質，並且未吸潮。
2.培（péi）養基配（pèi）置時，稱（chēng）量要準確，包括鹽水的分（fèn）裝（zhuāng）要準確。
3.一定要保證（zhèng）現配（pèi）製現滅菌，未滅菌的配好培養基（jī）不能長時間放置，更不可隔夜。
4.滅菌時要保證恒溫、恒壓，同時要保（bǎo）證有效滅菌時（shí）間。
5.滅菌過的培（péi）養基要冰箱保存，可保存一周，一般不超過 3 天。而且要遵循“先入先出（chū）”原則，先（xiān）配製的要先（xiān）使用。
6.在使用時，要（yào）根據當班次的使用量，用水浴鍋先將培養基溶化（huà）為（wéi）液態，然後（hòu）及時調低水域溫度（先化好的可從水域取出，放在水浴鍋鍋蓋上）待（dài）用，千萬不可長時間使培養基處於高溫狀態。
7.做產品微生物檢測時，傾倒培養基（jī）溫度在 45℃左右，不可過燙，避免將菌燙死；也不可過涼，化好（hǎo）的培養基又結塊（kuài）凝固，不便於觀察結（jié）果。
8.每（měi）瓶培養基均要做空白。
9.盡量集中做樣，避免（miǎn）頻繁打開同一瓶培養基瓶塞，增大培養基（jī）的汙染幾（jǐ）率（lǜ），出現誤差結果。
10.培（péi）養基剩餘過（guò）少（shǎo）時，可先將其傾倒成空白用板。

做樣環（huán）境的維持

一、大（dà）環境（房間（jiān））
1.做樣時，窗戶和空調要關閉，或用酒精對房間（jiān）進行噴霧消（xiāo）毒（dú），避免房間（jiān）內（nèi）空氣流通影響超淨台內部環境（在有通排風係統（tǒng）的恒（héng）溫恒濕無（wú）菌間進行操作）。
2.如果在原來的原料微生物檢（jiǎn）測室進行做樣，要定期開啟紫外燈，對房間進行殺菌。
二、小環境（超淨台）
1.定期清潔初效過（guò）濾器，要及時更換。
2.做樣前，將超淨（jìng）台內部進行清潔，用 75%酒精進行擦拭消毒，並（bìng）提前半小時將超淨台紫外（wài）燈打開，對超淨台內部（bù）環（huán）境進行殺菌。
3.關紫外燈，開風（fēng）機，調整合適進風量，風量不可過低。
4.每次做樣後，要對超淨台內部進（jìn）行清（qīng）理、清（qīng）潔，並用 75%酒精進行擦拭消毒。
5.紫外燈根（gēn）據其使用壽命（mìng）要及時（shí）更換。
6.做樣同時，要做（zuò）上相應菌落檢測的環境空白。
7.做樣區（qū）域的選擇（zé）：
①一般在（zài）距離超淨台外沿的 1/3-2/3 區域進行（háng）無菌操作；
②要在酒精燈火焰的外焰保護區域進行操作。

 工器（qì）具的潔淨（jìng）度

1.玻璃器皿：采用幹熱滅菌方式進行滅菌。

2.做樣用剪刀、勺子等物品要做到做樣專用，不可與其它操（cāo）作器（qì）具混用，使用時（shí），先用75%酒精消毒，再采（cǎi）用灼燒方式進行滅菌。

3.接種針（環）采用灼燒方（fāng）式進行滅菌，但要注意做樣（yàng）時要先將接種針（環）進行冷卻。

樣品的采集及檢測

一、保證采樣器具的無菌性
1.玻璃器皿：采用幹熱滅菌方式進行滅菌，保證恒溫、時間足夠（但不可時間過長，導（dǎo）致玻璃器皿易（yì）裂紋而報廢）。
2.取樣筐：使用前要用 75%酒精進行（háng）噴灑消毒
3.取樣勺、濃奶取樣（yàng）提子：要保證其清潔消毒（dú），清潔後用 75%酒精進行（háng）擦拭消毒。
4.取樣袋：可現用酒精進行擦拭消毒，再在超淨台用紫外燈照（zhào）射消毒，（包裝車間要在傳遞窗用紫外燈照射消毒）。
5.電子稱表麵用 75%酒精消毒。

二、人員（yuán）操作
1.保證手部的（de）清洗、消毒：取樣前及做樣前都要先洗手再消（xiāo）毒。
2.取樣要具有代表性（隨機樣、目（mù）的樣、綜合樣（yàng））且要標示清（qīng）楚。
3.取樣完畢，不可在（zài）車間逗留，要及時將樣品放入超淨台，對其外表（biǎo）麵進（jìn）行紫外燈照（zhào）射消毒。
4.在要求的（de）做樣區域進行操（cāo）作。
5.做樣前，要用 75%酒精棉（mián）球對樣品袋口（kǒu）部進行擦拭消毒，再開口。
6.往鹽水瓶加樣（yàng）品時，要注意勺子或袋子盡量不接觸瓶口。
7.樣品計量要準確（què），稀釋倍數也要準確（1mL 吸管不允許將管口敲掉），進行 100 倍稀（xī）釋（shì）時，1mL 吸管要伸入鹽水中，不可以將樣品管（guǎn）壁流下去，同時（shí）要（yào）避免將管底部捅破。
8.鹽水溫度以 40℃左右為（wéi）宜，不能過熱，將部分微生（shēng）物燙死，也不能（néng）溫度太（tài）低，不能將奶粉溶解（jiě）完全。
9.進行稀釋時，要搖（yáo）勻，保證溶液的均（jun1）一性。
10.傾倒平皿時，要注意培（péi）養基瓶（píng）口不要接觸（chù）到平皿；傾倒的培養基要適量，不可以太少，在培養過程中（zhōng）幹掉，微生物亦死亡，以 15mL 左右為宜。
11.做大腸（cháng）菌群樣時，要提前將乳糖膽鹽培（péi）養基培養管按需要量備好，放入超淨台對外表麵進行紫外線滅（miè）菌。
12.接二步時，要注（zhù）意（yì）先將（jiāng）接種針（環）進行（háng）冷卻，避免出（chū）現接不上菌落的情況發生，導致（zhì）無法判斷、確認。
13.做樣完畢，及時放入相應培養箱進行培養，並清理清（qīng）潔超淨台。