上海秉越電子儀器有限公司

一、微生物實（shí）驗室（shì）注意事項

1、工作室要矮小平（píng）整、光（guāng）滑、無凹凸（tū）不平（píng）或棱角、四壁及屋（wū）頂用不（bú）透水之材質，便於擦洗及殺菌。

2、室內采光麵積應大，從室外（wài）應能看到室內的情況。

3、為保證無菌（jun1）室的潔淨，無（wú）菌室周圍需設緩衝走廊，走廊旁再設緩衝間，其麵（miàn）積可小（xiǎo）於無菌室。

4、無菌室、緩衝走廊及緩衝間均設有日光燈及紫（zǐ）外燈，殺菌紫外燈離工作台以一米為（wéi）宜，其電源開（kāi）關應（yīng）設在室外。

5、無菌室與緩（huǎn）衝間進出口應設推拉（lā）門（mén），門與窗平齊，門縫要封緊，兩門要錯開（kāi），以免空氣對流造（zào）成汙染。

二、使用無菌室注意事項

1、無菌室要保持（chí）清潔整齊，室內僅存放必要的檢驗用品，如：酒精燈、酒精棉、火柴（chái）、鑷子、接種針、接種環、記（jì）號鉛等。

2、室內檢驗用具及（jí）桌凳應保持固定位置，不隨便移動。

3、每2周用2%消毒液（yè）（二（èr）氧化（huà）氯等）水溶液（yè）擦拭工作台、門、窗、桌凳及地（dì）麵，然後用二氧化氯溶液噴霧消毒空氣或過氧乙（yǐ）酸熏蒸，紫外（wài）燈殺菌（jun1）。

4、定期檢查室內空氣無菌狀態，進行細菌和黴菌的檢查。

5、無菌室殺菌（jun1）前應將所有物品置（zhì）於操作之部位，然後打開紫外燈（dēng）殺菌半小時，時間一到，關閉紫外燈（dēng）待用。

6、操作（zuò）應嚴（yán）格（gé）按照無菌操作規定進行（háng），操作少說（shuō）話，不喧（xuān）嘩，以保持環境的無菌狀態。

三、配製培養基注意事項

1、滅菌時嚴格按照規定加（jiā）熱、加壓，切忌時間過長壓力過高，否則（zé）會（huì）造（zào）成營養成分的破壞。

2、切忌使用銅鍋、鐵鍋配製（zhì）培養基（jī）。

3、培養基不能二次高壓滅菌。

4、劃線用培養基可放（fàng）入冰箱或培養箱除去水分。 

四、無菌操（cāo）作注意事項

1、進入無菌室之前先進行空氣消毒，工作人員進入無菌室以前，必須於緩衝間更換消毒過的工作服、工作（zuò）帽及工作鞋。

2、動作要輕，盡量減少走動，以免攪動空（kōng）氣。

3、操作要靠近酒精燈火焰區，使用（yòng）吸管要（yào）用吸球。

4、接種環/接種針用前用後進行火焰滅菌。

5、工（gōng）作結束作好終末（mò）消毒，所有培養物均（jun1）應高（gāo）壓滅菌後再扔（rēng）掉，以免汙（wū）染環境。

 

五、菌落總數測定注意事項（xiàng）

1、選取樣品要有代表性，如為固體（tǐ）樣品要多采幾個部位，液體檢樣要混勻。

2、每次做樣從開始到（dào）結束都要（yào）進行超淨台空氣淨度的監測，同時對所有滅菌物品做空白對照。

3、為減少稀釋倍數的誤差，在做連續遞增稀釋時，每一稀釋液應充分振搖使其均勻，同時每一稀釋度換一支（zhī）吸管。

4、在進（jìn）行連續稀釋時，應將吸（xī）管內液體沿壁流（liú）入，勿使吸管（guǎn）尖端觸及稀（xī）釋液。

5、傾倒營養瓊脂（zhī）培養（yǎng）基平板時，溫度要在46±1℃之（zhī）間，數量要在15ml左右為宜，不要太（tài）多太少。

6、培養物48h培養後培養基失重（chóng）不超過15%，培養箱內要放水。

7、檢樣加入平皿後應立即傾注培養基並（bìng）旋轉混勻，一般從稀釋（shì）到傾注不超過20分鍾。

8、平皿內如有鏈狀菌落生長時：菌落之間無明顯（xiǎn）界限且僅（jǐn）有一條鏈可視為一個菌（jun1）落，如為（wéi）不同來源（yuán）的幾條鏈則將每條鏈（liàn）各做（zuò）一個菌落記。

9、做菌落記數時平板裏所有的菌落都要記數。

 

六、大腸（cháng）菌群注意事項

1、對（duì）乳糖膽鹽管（guǎn）產氣的觀察隻要有氣泡往上冒就算產氣。

2、在（zài）伊紅美蘭瓊（qióng）脂平（píng）板上挑取菌落時（shí）一定要選典（diǎn）型菌落。

 

七、黴菌、酵母菌檢驗注意事項（xiàng）

1、稀釋樣品時用無菌（jun1）水。

2、3天觀察時把所有的酵母菌（jun1）做標記。

3、如（rú）果有黴菌被培養出，請不要把皿蓋隨便打開，待培養物高壓滅菌後再清洗。

 

八、壞包分析注意事項

1、對已開包的酸包脹包要馬上轉移到無菌瓶中，已（yǐ）防（fáng）二次汙染。

2、根據壞包的（de）不同表現狀態適當的選擇培（péi）養項目。

3、做微生物（wù）培養的同時（shí）測定感官、理化指標，注意其（qí）有何（hé）變化。

 

九、商業無菌注意事項

1、要求有厭（yàn）氧培養的一定要在厭氧（yǎng）環境下培養。

2、取樣測pH值，要與同批正常樣相（xiàng）比，看是否有顯著差異。

3、對pH 值有可疑的樣品都要做塗（tú）片染色鏡檢，與同批正常樣相比，看是否有明顯的微（wēi）生（shēng）物增殖現象（xiàng）。

4、保溫期間出現的脹包（bāo），漏包（bāo）、或開包發現PH、感官異常、變質，進一步鏡檢發現有異常數量細菌的樣品均應進行劃線培（péi）養。